Información

¿De qué se nombró la proteína G?

¿De qué se nombró la proteína G?


We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

La proteína G (la proteína de unión a anticuerpos bacterianos) se usa a menudo para extraer anticuerpos, por ejemplo, en experimentos de inmunoprecipitación de cromatina (ChIP).

Sin embargo, no pude encontrar un sitio que describa la historia de dicha proteína, y cómo surgió el nombre de Proteína G, debido al hecho de que la proteína G con un nombre similar (pero completamente diferente) apareció más arriba en los resultados de búsqueda.

¿De qué se nombró la proteína G? Por ejemplo, la proteína A recibió el nombre de la fracción de anticuerpo en la que se encontraba, y la proteína G se nombró porque se unió a GDP y GTP.


Como menciona @canadianer en su comentario, la Proteína G probablemente lleva el nombre de la cepa de estreptococos del grupo G humano, G148.

La proteína G, una proteína de la pared celular bacteriana con afinidad por la inmunoglobulina G (IgG), se ha aislado de una cepa de estreptococos del grupo G humano (G148).

Purificación y algunas propiedades de la proteína G estreptocócica, un nuevo reactivo de unión a IgG. - Björck et.al.

La proteína G es una proteína de Streptococcus que puede unirse a la porción Fc de la proteína inmunoglobulina G. Si bien es similar a la proteína A, se encontró que tiene mejores afinidades de unión a las diferentes variedades de regiones constantes de cadena pesada de moléculas de IgG.

La G proviene de la agrupación de Lancefield. La agrupación de Lancefield era un método que solía usarse para clasificar bacterias. Los estreptococos del grupo G se pudieron identificar usando suero de Lancefield tipo G y así es como recibieron su clasificación.


Reseñas

A Muth, et al. Desarrollo de análogos de radamida como inhibidores de Grp94. Bioorg Med Chem. 2014junio

Evnouchidou I y col. La dimerización ERAP1 – ERAP2 aumenta la eficiencia de recorte de péptidos. J Immunol. 2014June193 (2): 901-8

K Xu y col. La síntesis de AKAP3 está mediada por proteínas de unión a ARN y señalización de PKA durante la espermiogénesis de ratón. Biol Reprod. 2014Mar.

Kapadia B. y col. La fosforilación mediada por ERK2 de la proteína de unión al coactivador transcripcional PIMT / NCoA6IP en Ser298 aumenta la gluconeogénesis hepática. Más uno. 2013 Diciembre 178 (12): e83787.

Youker KA., Et al. Una alta proporción de pacientes con insuficiencia cardíaca en etapa terminal, independientemente de la etiología, demuestra el depósito de anticuerpos anti-cardíacos en el miocardio defectuoso: activación humoral, un contribuyente potencial a la progresión de la enfermedad. Eur Heart J. 2013 29 de diciembre.

Bilichak A. y col. La progenie de plantas de Arabidopsis thaliana expuestas a la sal exhibe cambios en la metilación del ADN, modificaciones de histonas y expresión génica. Más uno. 2012 7 (1): e30515.

Y Kuroda., Et al. Método de electroforesis capilar mejorado para el análisis de transferrina deficiente en carbohidratos en suero humano, evitando la interferencia del complemento C3. J Pharm Biomed Anal. 2013 Marzo de 2576: 81-6.

Dai C. y col. La pérdida de supresor de tumores Nf1 activa Hsf1 para promover la carcinogénesis. J Clin Invest. 2012 Oct 1122 (10): 3742-54.

Crystal Morales y col. Drosophila La glicoproteína 93 es un ortólogo de la proteína de choque térmico de mamíferos gp96 (grp94, HSP90b1, HSPC4) y retiene la función chaperona independiente del enlace disulfuro para TLR e integrinas. J Immunol. 2009 Octubre de 15183 (8): 5121-8.


SpinTrap de proteína G HP

Protein G HP SpinTrap es una columna de centrifugado preenvasada de un solo uso que contiene Protein G Sepharose High Performance.

Seleccionar modelo

Protein G HP SpinTrap es una columna de centrifugado preenvasada de un solo uso que contiene Protein G Sepharose High Performance.

  • Para la purificación simple a pequeña escala de anticuerpos o el enriquecimiento de proteínas específicas en columnas de centrifugación preempaquetadas que están listas para usar.
  • Los protocolos clásicos y de enlace cruzado proporcionan flexibilidad.
  • Condiciones de elución formateadas para flujos de trabajo de análisis de electroforesis y LC-MS.
  • La cinética de unión rápida y la alta capacidad proporcionan un alto rendimiento.
  • Preenvasado con Protein G Sepharose High Performance para acoplamiento de anticuerpos de subclases de IgG.
  • Fácil ampliación con columnas preempaquetadas HiTrap Protein G HP.

Protein G Sepharose HP tiene una alta afinidad por la región Fc de IgG de una variedad de especies. Las dos opciones del protocolo de enriquecimiento de proteínas permiten eluir el antígeno adjunto por separado (protocolo de enlace cruzado) o junto con el anticuerpo (protocolo clásico).

También existe un protocolo para la purificación eficaz a pequeña escala de anticuerpos monoclonales y policlonales de suero y sobrenadantes de cultivos celulares en menos de 20 min. No se requiere pretratamiento de la muestra.

Para mayor escala, utilice Protein G HP MultiTrap y HiTrap Protein G HP


MagBeads de proteína A, G y A / G

GenScript Protein A, G y A / G MagBeads están desarrollados para una rápida, conveniente y reproducible inmunoprecipitación (IP) y purificación de inmunoglobulina a pequeña escala. Al pre-acoplar covalentemente proteínas A, G y A / G recombinantes a la superficie de perlas superparamagnéticas, estas MagBeads brindan a los usuarios procedimientos simples, fáciles y que ahorran tiempo para la separación inmunomagnética.

Debido a la eliminación de dominios que no se unen a IgG y otros fragmentos de función desconocida, las proteínas A, G y A / G recombinantes muestran una alta afinidad por las subclases de IgG de muchas especies, incluidas la humana, el conejo y el ratón, etc. Esto permite la purificación de IgG de sobrenadantes de cultivos celulares, suero y ascitis u otras muestras de partida. Además, las Proteína A, G y A / G MagBeads también pueden usarse para inmunoprecipitar proteínas diana de muestras crudas usando un anticuerpo primario seleccionado. Para evitar la coelución del anticuerpo, es necesario reticular químicamente el anticuerpo con perlas recubiertas de proteína A, G y A / G antes de las etapas de inmunoprecipitación. Lee mas "

Al aplicar la tecnología de separación magnética, las Protein A, G y A / G MagBeads proporcionan a los investigadores procedimientos de aislamiento / IP rápidos, fáciles y eficientes. También se necesita una rejilla de separación magnética para usar MagBeads. Todos los pasos se realizan en un solo tubo, sin necesidad de columnas, centrifugación o pretratamiento. El manejo magnético extremadamente suave evita la pérdida de las IgG o proteínas objetivo y las mantiene intactas durante todo el procedimiento. Las MagBeads de proteína A, G y G / G son las herramientas perfectas para la inmunoprecipitación y la purificación de IgG a pequeña escala.

Tabla 1. Propiedades de las proteínas recombinantes A, G y L en resinas

Proteína A Proteína A
MagBeads MX
Proteína G Proteína G
MagBeads MX
Proteína A / G
Fuente Staphylococcus aureus Staphylococcus aureus Estreptococo Estreptococo
Peso molecular 34 kDa 34 kDa ≈22 kDa ≈22 kDa 43 kDa
Número de sitios de unión de IgG (Ig) 5 5 3 3 4 de proteína A y 2 de proteína G
Capacidad de unión de IgG 10 mg de IgG de conejo por ml de perlas sedimentadas ≧ 30 mg de IgG humana por ml de perlas sedimentadas 10 mg de IgG de cabra por ml de perlas sedimentadas ≧ 25 mg de IgG humana por ml de perlas sedimentadas 10 mg de IgG de cabra por ml de perlas sedimentadas
No gato. L00273 L006724 L00274 L006734 L00277

Carril M, Estándar de peso molecular de proteínas.
Carril 1, Flujo de suero de conejo.
Carril 2, IgG de conejo purificada a partir de suero.
Carril 3, Lisado bacteriano que expresa proteína marcada con His.
Carril 4, Proteína marcada con His inmunoprecipitada, 32 kDa (anticuerpo anti-His reticulado con MagBeads).

Figura 2. Purificación de IgG de conejo a partir de suero de conejo e inmunoprecipitación de proteína marcada con His a partir de lisado bacteriano usando GenScript Protein A MagBeads.

  • Sistema de separación magnética semiautomatizado:Acorte el tiempo de purificación de proteínas y anticuerpos.
  • Perlas magnéticas recubiertas de anticuerpo con etiqueta de epítopo: Inmunoprecipitación y aislamiento rápido de proteínas marcadas.
  • Racks de separación magnética:Dispositivo bien diseñado y practicable en tecnología de separación biomagnética.

Citas

  • Tradtrantip L. y col. Escisión terapéutica del autoanticuerpo anti-acuaporina-4 en la neuromielitis óptica por una proteinasa selectiva de IgG. Mol Pharmacol.2013 Jun83 (6): 1268-75.
  • Song SE., Et al. IGFBP5 media la activación de fibroblastos cardíacos inducida por glucosa alta. J Mol Endocrinol.2013 Abril de 1250 (3): 291-303.
  • Dong DJ. Y col. Regulación de la hormona esteroide 20-hidroxiecdisona de la fosforilación del receptor de lipoproteínas de muy alta densidad (VHDL) para la captación de VHDL. Insect Biochem Mol Biol.2013 43 de abril (4): 328-35.
  • Yin Y. y col. Genes expresados ​​diferencialmente de células endoteliales microvasculares humanas en respuesta a anticuerpos contra NS1 del virus del dengue mediante hibridación sustractiva de supresión. Immunol viral.2013 26 de junio (3): 185-91.
  • Jennings VA. Y col. El transportador de células dendríticas y asesinas activadas por linfocinas mejora la terapia con reovirus oncolíticos para el cáncer de ovario al superar la neutralización de anticuerpos en la ascitis. Int J Cancer.2014 Mar 1134 (5): 1091-101.
  • Hwang JH. Y col. Isoformas de proteína fosfatasa 2A que utilizan andamios Aβ regulan la diferenciación mediante el control de Akt. J Biol Chem.2013 Noviembre de 1288 (44): 32064-73.
  • Lan JF. Y col.La prohibitina interactúa con las proteínas de la envoltura del virus del síndrome de la mancha blanca y previene la infección en el cangrejo de río rojo Procambarus clarkii. J Virol.2013 Dec87 (23): 12756-65.
  • Asavapanumas N. et al. Patología única de neuromielitis óptica producida en ratas sin tratamiento previo por administración intracerebral de NMO-IgG. Acta Neuropathol.2013 5 de noviembre.
  • Liu W. y col. La función hormono-dependiente de Hsp90 en la diafonía entre la 20-hidroxiecdisona y las vías de señalización de la hormona juvenil en insectos está determinada por la fosforilación diferencial y las interacciones proteicas. Biochim Biophys Acta.2013 Noviembre de 1830 (11): 5184-92.
  • Mabashi-Asazuma H., y col. Un nuevo vector de baculovirus para la producción de glicoproteínas recombinantes no fucosiladas en células de insectos.Glicobiología.2013 9 de diciembre.
  • XW Wang y col. La lectina de tipo C se une a la integrina β para promover la fagocitosis hemocítica en un invertebrado. J Biol Chem.2013 9 de diciembre.
  • Tubon TC Jr. y col. Mejora de la formación de memoria mediada por dCREB2.J Neurosci.2013 Abril 2433 (17): 7475-87.
  • Short KR., Et al. Los anticuerpos median la formación de trampas extracelulares de neutrófilos (NET) en el oído medio y facilitan la otitis media neumocócica secundaria. Infect Immun.2014 Jan82 (1): 364-70.
  • Armistead JS. Y col. Los anticuerpos contra un solo epítopo conservado en Anopheles APN1 inhiben la transmisión universal del paludismo por P. falciparum y vivax. Infect Immun.20139 de diciembre.
  • Zhang D. y col. Generación y caracterización de un nuevo anticuerpo recombinante contra LMP1-TES1 del virus de Epstein-Barr aislado por presentación de fagos. Virus.2013 225 de abril (4): 1131-42.
  • De Oliveira SN. Y col. Una proteína de fusión CD19 / Fc para la detección de receptores de antígenos quiméricos anti-CD19. J Transl Med.2013 29 de enero a las 11: 23.
  • Safdari Y., et al. humMR1, un anticuerpo monocatenario humanizado altamente específico para dirigirse a EGFRvIII. Int Immunopharmacol.2013 Diciembre de 2518 (2): 304-310.
  • Lin H. y col.Un nuevo anticuerpo Fab humano para Trop2 inhibe el crecimiento del cáncer de mama in vitro e in vivo.Int J Cancer.2014 Marzo de 1134 (5): 1239-49.

Resinas de purificación de proteínas etiquetadas: purificación de proteínas marcadas con polihistidina, GST, biotina y estreptavidina.


Columna de proteína G para purificación de anticuerpos de uso general

Las columnas HiTrap Protein G HP están preenvasadas con resina Protein G Sepharose High Performance. Esta resina de afinidad de proteína G es una buena primera opción para la captura de anticuerpos de propósito general a escala de laboratorio, porque se une a una gama más amplia de IgG de especies eucariotas y también se une a más subclases de IgG que las resinas basadas en proteína A.

Utilice estas columnas para la purificación de IgG de fuentes de vaca, oveja, caballo, rata, ratón y seres humanos, incluidos sobrenadantes de ascitis, suero y cultivos celulares.

Las columnas HiTrap Protein G HP ofrecen purificaciones de alta resolución y alto rendimiento con una capacidad de unión de 25 mg de IgG / ml de resina y cinética rápida. Las columnas son estables en un amplio rango de pH: pH operativo de 3 a 9 y pH de 2 a 10 para la limpieza.


¿Qué es la proteína A?

La proteína A se define como una proteína de superficie que tiene un tamaño de 42 kDa. La proteína A se encuentra originalmente en la pared celular de Staphylococcus aureus. Está codificado por el gen "spa". La proteína A está regulada por la topología del ADN, la osmolaridad celular y un sistema de dos componentes. Esta proteína recombinante microbiana está muy involucrada en las reacciones bioquímicas, debido a su capacidad para unirse a varios tipos de anticuerpos como IgG, IgA, IgE e IgM. Entonces, esta proteína microbiana se usa para purificar tipos de anticuerpos humanos. Tiene cinco dominios de unión "Ig" homólogos que se pliegan en haces de tres hélices. Cada dominio es capaz de unirse a proteínas de inmunoglobulina de muchas especies de mamíferos, más notablemente con anticuerpos IgG. La proteína A se une específicamente a la cadena pesada de la región Fc de la mayoría de las inmunoglobulinas.

Con respecto a las proteínas de la familia VH3 humana, la proteína A se une a la región Fab. La proteína A recombinante tiene una capacidad más amplia para unirse a otros anticuerpos humanos (IgA, IgE, IgM) distintos del anticuerpo IgG. Pero está compitiendo débilmente con la IgG humana.3 subclase y no se une con el anticuerpo humano IgD. La proteína A también es capaz de unirse a anticuerpos IgG de otras especies como caballo, conejo, ratón, perro, mono, vaca, etc.

Figura 01: Proteína A

La proteína A juega un papel fundamental en Staphylococcus aureus Patogénesis. Esta proteína facilita la unión de las bacterias a la superficie recubierta del factor de Von-Willebrand humano. Por tanto, está aumentando la eficacia de la infección bacteriana. La proteína A también paraliza la inmunidad mediada por humoral humana. Esta proteína microbiana recombinante se produce mediante el proceso de fermentación industrial.


Dominios y repeticiones

Tecla de funciónPuesto (s)Descripción Acciones Vista graficaLargo
& ltp> Esta subsección de la sección & lta href = "http://www.uniprot.org/help/family%5Fand%5Fdomains%5Fsection"> Familia y dominios & lt / a> describe la posición y el tipo de un dominio, que está definido como una combinación específica de estructuras secundarias organizadas en una estructura tridimensional característica o pliegue. & ltp> & lta href = '/ help / domain' target = '_ top'> Más. & lt / a> & lt / p> Dominio i 3 – 46 Anotación IgG_binding_B InterPro

& # xd & ltp> Información que ha sido generada por el sistema de anotación automática UniProtKB, sin validación manual. & lt / p> & # xd & # xd & ltp> & lta href = "/ manual / evidences # ECO: 0000259"> Más. & lt / a> & lt / p> & # xd Aserción automática inferida de la coincidencia de firma i

Aserción automática inferida de la coincidencia de firmas i

Aserción automática inferida de la coincidencia de firmas i

Bases de datos familiares y de dominio

Recurso integrado de familias de proteínas, dominios y sitios funcionales

Base de datos de dominio de proteínas pfam


Procesamiento de moléculas

Tecla de funciónPuesto (s)Descripción Acciones Vista graficaLargo
& ltp> Esta subsección de la sección 'PTM / Procesamiento' describe la extensión de una cadena polipeptídica en la proteína madura después del procesamiento o escisión proteolítica. & ltp> & lta href = '/ help / chain' target = '_ top'> Más. & lt / a> & lt / p> Cadena i PRO_0000127700 1 – 340 Proteína de unión a nucleótidos de guanina G (I) / G (S) / G (T) subunidad beta-3 Agregar BLAST 340

Bases de datos proteómicas

jPOST - Base de datos / repositorio estándar de proteomas de Japón

MaxQB: la base de datos MaxQuant

PaxDb, una base de datos de promedios de abundancia de proteínas en los tres dominios de la vida

Base de datos de PRoteomics IDEntifications

ProteomicsDB: un recurso de proteoma de múltiples organismos

Bases de datos PTM

Recurso integrado de iPTMnet para PTM en el contexto de la biología de sistemas

Recurso completo para el estudio de modificaciones postraduccionales de proteínas (PTM) en humanos, ratones y ratas.


Interacciones fuera del sitio de combinación de antígenos

B. PROTEÍNA G ESTREPTOCOCICA

La proteína G estreptocócica es una proteína de la pared celular con una parte extracelular compuesta por dos (o tres) dominios pequeños que se unen a la albúmina sérica (dominios GA) y dos (o tres) dominios de unión a inmunoglobulinas (dominios B). Según los estudios de espectroscopia de RMN y cristalografía de rayos X, los dominios B están compuestos por una hélice α central empaquetada contra una hoja β de cuatro hebras (Gronenborn y Clore, 1993 Sauer-Eriksson et al., 1995). Las constantes de equilibrio de la reacción entre la proteína G y la IgG humana, de conejo, de ratón y de cabra oscilan entre 10 10 M −1 y 10 10 M −1, que es mayor que los valores correspondientes para la unión de la proteína A (Åckerström y Björck, 1986 ). La unión a proteína G es óptima a pH 4-5, mientras que la unión óptima a proteína A es a pH 8.0.

Las cuatro subclases de IgG humana interactúan con la proteína G con alta afinidad (Tabla 22). La proteína G se une tanto a la Fc como a las porciones de Fab. Sin embargo, las interacciones entre la proteína G y Fab son mucho más débiles que la interacción con Fc. Algunas inmunoglobulinas interactúan con la proteína G predominantemente por Fab, como la IgG1 de ratón, mientras que otras se unen a la proteína G principalmente por Fc, como la IgG humana (Lian et al., 1994). Fab de IgG2 humana no puede reaccionar con la proteína G (Perosa et al., 1997 ).

Las interacciones entre la proteína G y las regiones Fab y Fc se estudiaron por RMN y por cristalografía de rayos X (Derrick y Wrigley, 1994 Sauer-Eriksson et al., 1995 Lian et al., 1994 Kato et al., 1994). El sitio de unión a Fc para el dominio B se encuentra en la hendidura entre el CH2 y CH3 dominios, similar al sitio de unión utilizado por la proteína A (Fig. 79). Tres residuos de CH2 y cuatro residuos de CH3 están involucrados en las interacciones interfaciales. Ocho residuos del dominio B de unión a inmunoglobulina, incluidos cinco residuos de α-hélice, contribuyen a la interfaz. Aunque los sitios de unión de Fc para la proteína G y la proteína A se superponen ampliamente, los modos de interacciones son bastante diferentes en ambos casos. El complejo de proteína G-Fc involucra principalmente contactos cargados y polares: la proteína G tiene 12 interacciones polares o cargadas con Fc y ningún contacto hidrofóbico. Los contactos de proteína A y Fc se estabilizan principalmente a través de interacciones hidrófobas inespecíficas. Se producen cinco contactos hidrofóbicos pero solo seis interacciones polares entre la proteína A y Fc.

El dominio B de la proteína G utiliza porciones diferentes que no se superponen para unirse a Fab y Fc. La segunda cadena β del dominio B se une a Fab, formando una hoja β antiparalela con la séptima cadena β de la CH1, que incluye residuos de Ser-209 a Lys-216 (Fig. 80). Además, hay un segundo contacto menor entre la α-hélice del dominio B con la primera β-cadena en CH1 (residuos Pro-125 a Tyr-129). Ambos contactos forman una extensa superficie de unión entre el dominio B y Fab, que es comparable en tamaño con los sitios de interacción anticuerpo-antígeno. La parte de contacto de Fab está altamente conservada entre diferentes subclases y especies y tal estrategia de unión de la proteína G minimiza los efectos de la variabilidad de secuencia sobre la inmunoglobulina. No se encontraron grandes cambios en la conformación en ninguna de las proteínas durante la formación del complejo.

FIGURA 80. Interacción del dominio III de la proteína G con el CH1 dominio de un fragmento Fab de ratón.

(Derrick y Wrigley, 1992. Reimpreso con permiso). Copyright © 1992


Ver el vídeo: G-Protein Receptor Activation Video.. (Junio 2022).


Comentarios:

  1. Heikki

    Te pido disculpas, pero, en mi opinión, cometes un error. Puedo probarlo. Escríbeme por MP.

  2. Faer

    aaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaa ...

  3. Yvon

    Sí, ahora está claro...De lo contrario, realmente no entendí de inmediato dónde está la conexión con el título en sí ...

  4. Hyperion

    Que frase... genial, genial idea

  5. Carelton

    frase verdadera



Escribe un mensaje